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dc.contributor.advisorQuiñones Aguilar, Mauro Maximoes_PE
dc.contributor.advisorJusto Arévalo, Santiagoes_PE
dc.contributor.authorCastillo Chávez, Adriana Alexandraes_PE
dc.date.accessioned2024-05-02T17:19:36Z
dc.date.available2024-05-02T17:19:36Z
dc.date.issued2023
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/20.500.14138/7581
dc.description.abstractLa enzima cianuro dihidratasa (CynD) es producida por algunas bacterias y es capaz de degradar el cianuro, una sustancia tóxica utilizada en varias industrias. Para biorremediar el cianuro se necesita mantener un pH de 9, lo que hace que la CynD de algunas bacterias pierdan su actividad. Se necesita la estructura tridimensional de la CynD para entender mejor las interacciones entre sus dominios y superficies y mejorar su tolerancia al pH mediante la creación de mutantes. El objetivo de esta investigación es expresar, purificar y cristalizar la rCynD de B. safensis PER-URP-08 (rCynDPER-URP-08). Se evidenció que diferentes concentraciones de inóculo de plásmido (67,8; 135,6 y 271,2 ng/ μL) pueden transformar Escherichia coli BL21(DE3)(pLysS) con una eficiencia de 1,24; 2,3x10-1 y 7,7x10-1 ufc/ng respectivamente (p=0,49), y que se puede inducir rCynDPER-URP-08 con IPTG a 18o, 30 y 37oC (p=0,1). Así mismo, se obtuvo que la pureza de la proteína es similar al realizar una cromatografía con elución isocrática o en gradiente (p=1). Con respecto a la actividad enzimática, el Km y kcat de rCynDPER-URP-08 se mantiene a pH 9 (p=0.48 y p=0.093 respectivamente), por lo cual, debe ser considerada como candidata para la biorremediación de residuos con cianuro. En cuatro de las condiciones utilizadas se lograron obtener cristales, siendo los más grandes los generados con la adición de un stock de aminoácidos (60-95 μm), mientras que los cristales generados con los cationes divalentes tuvieron un tamaño más pequeño (27,78-29,09 μm) (p=0,0032). Dado que estos aditivos tienen la capacidad de formar sales, es necesario que un siguiente estudio analice el patrón de difracción de rayos X para determinar que los cristales son de proteínases_PE
dc.formatapplication/pdfes_PE
dc.language.isospaes_PE
dc.publisherUniversidad Ricardo Palmaes_PE
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccesses_PE
dc.rights.urihttps://creativecommons.org/licenses/by/4.0/es_PE
dc.sourceUniversidad Ricardo Palma. Repositorio institucional - URPes_PE
dc.subjectCianuro dihidratasaes_PE
dc.subjectCynDes_PE
dc.subjectBacillus safensises_PE
dc.subjectCristalizaciónes_PE
dc.titleExpresión, purificación y cristalización de la proteína rCynD de Bacillus safensis PER-URP-08es_PE
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesises_PE
thesis.degree.disciplineEscuela Profesional de Biologíaes_PE
thesis.degree.grantorUniversidad Ricardo Palma. Facultad de Biologíaes_PE
thesis.degree.nameLicenciada en Biologíaes_PE
dc.publisher.countryPEes_PE
dc.subject.ocdehttps://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.10es_PE
renati.advisor.orcid0000-0001-5026-5865es_PE
renati.advisor.orcid0000-0001-8833-4395es_PE
renati.typehttps://purl.org/pe-repo/renati/type#tesises_PE
renati.levelhttps://purl.org/pe-repo/renati/level#tituloProfesionales_PE
renati.discipline511206es_PE
renati.jurorCruz Neyra, Lidia Luzes_PE
renati.jurorPineda Chavarria, Roberto Christianes_PE
renati.jurorGuerra Santa Cruz, Alcideses_PE
renati.author.dni70005714
renati.advisor.dni25757894
renati.advisor.dni46700251


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